無菌室潔凈度的檢測(cè)方法與步驟

無菌室在消毒處理后、無菌試驗(yàn)前及操作過程中需要檢測(cè)空氣中的菌落數(shù)，以此來判斷無菌室是否達(dá)到規(guī)定的潔凈度。

一、無菌室潔凈度的檢測(cè)方法主要有沉降菌和浮游菌測(cè)定方法兩種：

（1）沉降菌檢測(cè)方法與標(biāo)準(zhǔn)：

以無菌方式將3個(gè)營養(yǎng)瓊脂平板帶入無菌操作室，在操作區(qū)臺(tái)面左、中、右各放1個(gè)；打開平板蓋，在空氣中暴露30min后將平板蓋好，置36℃±1℃培養(yǎng)48h，取出檢測(cè)，3個(gè)平板上生長的菌落數(shù)平均小于1個(gè)。

（2）浮游菌檢測(cè)方法及標(biāo)準(zhǔn)：

用專門的采樣器，宜采用撞擊法機(jī)制的采樣器（宏瑞科技FSC-A6），一般采用狹縫式或離心式采樣器，并配有流量計(jì)和定時(shí)器，嚴(yán)格按儀器說明書的要求操作并定時(shí)校驗(yàn)，采樣器和培養(yǎng)皿進(jìn)入被測(cè)房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，使用的培養(yǎng)基為營養(yǎng)瓊脂或藥典認(rèn)可的其他培養(yǎng)基。使用時(shí)，先開動(dòng)真空泵抽氣，時(shí)間不少于5min，調(diào)節(jié)流量、轉(zhuǎn)盤、轉(zhuǎn)速。關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上采樣器蓋子后調(diào)節(jié)縫隙高度。置采樣品采樣點(diǎn)后，依次開啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。

全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿置36℃±1℃培養(yǎng)48h，取出檢測(cè)，浮游菌落數(shù)不得超過5個(gè)/m3。每批培養(yǎng)基應(yīng)選定3只培養(yǎng)皿做對(duì)照培養(yǎng)。

無菌操作臺(tái)面或超凈工作臺(tái)還應(yīng)定期檢測(cè)其懸浮粒子，應(yīng)達(dá)到100級(jí)（可用宏瑞科技?jí)m埃粒子計(jì)數(shù)器）檢測(cè)，并根據(jù)無菌狀況必要時(shí)置換過濾器。

• 定期進(jìn)行潔凈度再驗(yàn)證：

定期或者當(dāng)無菌室設(shè)施發(fā)生重大改變時(shí)，要換國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T16292-16294-1996《醫(yī)藥工業(yè)無菌室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》進(jìn)行潔凈度再驗(yàn)證，以確保潔凈度符合規(guī)定，保存驗(yàn)證原始記錄，定期歸檔保存，并將驗(yàn)證結(jié)果記錄在無菌室使用登記冊(cè)上，作為實(shí)驗(yàn)環(huán)境原始依據(jù)及趨勢(shì)分析資料。并定期對(duì)無菌室的環(huán)境檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行趨勢(shì)分析和評(píng)估，根據(jù)評(píng)估結(jié)果，了解無菌室設(shè)施環(huán)境質(zhì)量的穩(wěn)定狀況及變化趨勢(shì)，決定是否有必要修訂相應(yīng)的警戒和糾偏限度。

• 定期更換新的紫外燈管、更換凈化系統(tǒng)的初效、中效、頭：

定期（至少每年1次）更換新的紫外燈管，以確保紫外燈管滅菌持續(xù)有效。并同時(shí)在使用登記本上做好更換記錄，定期歸檔保存。至少2年1次，或按無菌室驗(yàn)證實(shí)際情況，定期更換初效、中效、頭以確保凈化系統(tǒng)的功能持續(xù)有效，并同時(shí)在使用登記本上做好更換記錄，定期歸檔保存。